Cómo se usa
- Introduce la concentración de partida, el factor de dilución y el número de pasos. Diez veces a lo largo de cinco pasos son un factor de 10 y 5 pasos.
- El volumen total por tubo es opcional. Si lo dejas en blanco obtienes la concentración de cada paso; si lo rellenas, se calculan además el volumen de transferencia y el de diluyente.
- Editar una celda de la columna Factor de dilución permite que un paso se salga del resto. Al cambiar cualquiera de ellos, el campo de arriba pasa a «Personalizado».
- [Usar un solo factor para todos] los devuelve a su sitio. Una celda vacía sigue el factor común de arriba.
- Los resultados se actualizan mientras escribes. No hay botón de calcular.
Fórmula y notas
Una dilución seriada llega a un rango amplio de concentraciones repitiendo la misma dilución pequeña. Bajar diez mil veces de una sola vez obliga a transferir un volumen demasiado pequeño para pipetearlo bien; cuatro pasos de diez veces llegan al mismo sitio con un volumen manejable en cada uno.
Cada paso divide la concentración anterior entre el factor.
- Concentración en el paso n
- Cₙ = C₀ ÷ (factor)ⁿ
Cuando el factor cambia de un paso a otro, se divide entre el producto de los factores hasta ese punto.
- Con factores distintos
- Cₙ = C₀ ÷ (f₁ × f₂ × … × fₙ)
Una vez fijado el volumen total V por tubo, la transferencia y el diluyente salen de ahí.
- Transferencia
- V ÷ factor
- Diluyente
- V − (V ÷ factor)
Una dilución de diez veces en 1 mL supone llevar 100 μL del tubo anterior y añadir 900 μL de diluyente.
Notas prácticas
- Mezcla bien en cada paso. Arrastrar un tubo sin mezclar pasa su error a todos los pasos siguientes y, como los errores de una dilución seriada se multiplican, el que se comete pronto es el que más cuesta.
- Cambia la punta entre pasos. La solución concentrada que queda pegada por fuera de la punta sube las concentraciones de los pasos siguientes por encima de lo calculado.
- Cuando la transferencia baja de 1 μL más o menos, un factor más pequeño repartido en más pasos es más exacto. Siete pasos de cinco veces suelen ser más llevaderos que cinco de diez veces.
- Los volúmenes de la tabla dejan cada tubo en el volumen total que hayas fijado. Si necesitas más que eso del último tubo, fija un total mayor: cada tubo pierde lo que se lleva al siguiente.
- Las sustancias que se adsorben con facilidad —algunas proteínas, los oligonucleótidos— pueden quedar por debajo de lo calculado en el extremo más diluido. Piensa en tubos de baja adsorción o en añadir un portador.
Preguntas frecuentes
Se usan a menudo juntas
Molaridad
Calcula la masa, el peso molecular, el volumen o la molaridad a partir de los otros tres.
Regresión de curva estándar
Ajusta una regresión lineal para obtener la pendiente, la ordenada en el origen y el R², y después calcula hacia atrás las concentraciones desconocidas.
Diluciones
Resuelve C1V1 = C2V2 para el valor que falte.