Cómo se usa
- Fija el volumen de una reacción terminada y cuántas vas a preparar.
- Decide el exceso. Un porcentaje crece con el lote; sumar reacciones enteras va mejor cuando son pocas.
- Anota qué lleva una reacción. Puedes poner el volumen directamente, o la concentración de la solución madre y la final y dejar que salga el volumen.
- Deja el agua como el componente que completa el resto. Será el volumen de reacción menos todo lo demás.
- Lee la columna del total: eso es lo que se pipetea en el tubo.
Cómo se calcula y qué vigilar
Cada componente pasa de una reacción al lote entero, y uno de ellos absorbe la diferencia.
Un volumen a partir de la solución madre y la concentración final
Es lo único que sigue siendo correcto si cambia el volumen de reacción, y por eso conviene entrarlo así.
- µL por reacción = conc. final ÷ conc. madre × volumen de reacción
El lote
El exceso se aplica una sola vez, al número de reacciones, así que la proporción entre componentes se mantiene.
- reacciones preparadas = reacciones × (1 + exceso ÷ 100)
- µL totales = µL por reacción × reacciones preparadas
El componente que completa el resto
- agua = volumen de reacción − todo lo demás
Conviene saber
- El exceso hace falta porque siempre queda algo en la punta y en el tubo. El 10 % es un punto de partida habitual; con muy pocas reacciones resulta más claro sumar una o dos reacciones enteras.
- Si hay concentración madre y final, mandan sobre el volumen escrito a mano. No se oculta nada: el volumen que sale es el que muestra la tabla.
- Aquí el molde es un componente más. En una placa se añade pocillo a pocillo, y esa es la diferencia entre esta herramienta y el diseñador de placas de PCR.
- Esta herramienta y el diseñador de placas de PCR comparten una sola implementación de la receta, así que no pueden dar números distintos.
Preguntas frecuentes
Se usan a menudo juntas
Diseñador de placas de PCR y master mix
Distribuye una placa de 96 pocillos y obtén los volúmenes de mezcla que le corresponden, en una sola página imprimible.
Eficiencia de amplificación en qPCR
Calcula la eficiencia de amplificación (%) y el factor por ciclo a partir de la pendiente de una curva estándar.
Resuspensión de oligonucleótidos
Pega la lista completa de un pedido y obtén de una vez el volumen de solución amortiguadora de cada tubo, con exportación al portapapeles y a Excel.