사용 방법
- 초기 농도와 희석 배수, 단계 수를 입력합니다. 예를 들어 10배씩 5단계라면 배수 10, 단계 5입니다.
- 튜브당 총 부피는 선택 입력입니다. 비워 두면 단계별 농도만 나오고, 입력하면 각 단계에서 옮길 양과 채울 희석액 양까지 함께 계산됩니다.
- 표의 「희석 배수」 칸을 고치면 단계마다 다른 배수를 쓸 수 있습니다. 하나라도 다르게 넣으면 위쪽 배수 입력란이 ‘사용자 설정’으로 바뀝니다.
- 되돌리려면 [배수 모두 같게]를 누르세요. 배수 칸을 비우면 위쪽 공통 배수를 따릅니다.
- 입력하는 즉시 계산됩니다. 별도의 계산 버튼은 없습니다.
공식 설명 및 주의사항
연속 희석은 같은 희석을 여러 번 반복해 넓은 농도 범위를 만드는 방법입니다. 한 번에 10,000배를 희석하려면 아주 작은 부피를 옮겨야 해서 오차가 커지는데, 10배씩 4번으로 나누면 매번 다루기 좋은 부피로 같은 결과에 도달합니다.
각 단계의 농도는 앞 단계 농도를 배수로 나눈 값입니다.
- n단계 농도
- Cₙ = C₀ ÷ (배수)ⁿ
단계마다 배수가 다르면 그때까지의 배수를 모두 곱한 값으로 나눕니다.
- 배수가 다를 때
- Cₙ = C₀ ÷ (f₁ × f₂ × … × fₙ)
튜브당 총 부피 V를 정하면, 각 단계에서 옮길 양과 채울 양은 이렇게 나옵니다.
- 옮길 양
- V ÷ 배수
- 채울 희석액
- V − (V ÷ 배수)
10배 희석에 총 부피 1 mL이면 앞 튜브에서 100 μL를 옮기고 희석액 900 μL를 채웁니다.
실무 주의사항
- 각 단계마다 충분히 섞어야 합니다. 섞지 않고 다음 단계로 옮기면 그 오차가 이후 모든 단계에 누적됩니다. 연속 희석의 오차는 곱해지기 때문에 초반 실수일수록 영향이 큽니다.
- 단계마다 팁을 바꾸세요. 앞 단계의 고농도 용액이 팁 바깥에 묻어 넘어가면 뒤쪽 농도가 계산보다 높아집니다.
- 옮길 양이 아주 작아지면(대략 1 μL 미만) 배수를 낮추고 단계를 늘리는 편이 정확합니다. 10배 5단계보다 5배 7단계 쪽이 다루기 쉬운 경우가 많습니다.
- 표에 나오는 부피는 각 튜브를 그 총 부피로 맞추는 기준입니다. 마지막 튜브에서 실제로 쓸 양이 더 필요하면 총 부피를 늘려 잡으세요. 앞 튜브에서 다음 단계로 옮기고 나면 그만큼 줄어듭니다.
- 흡착이 잘 되는 물질(일부 단백질, 올리고 등)은 저농도 구간에서 계산보다 낮게 나올 수 있습니다. 저흡착 튜브나 담체 첨가를 고려하세요.