Cómo se usa
- Pega las columnas de sustrato y de velocidad *inicial*. La velocidad inicial es la pendiente del primer tramo recto de una curva de progreso.
- Reparte las concentraciones de sustrato a ambos lados de Km, desde unos 0.2 × Km hasta pasar de 5 × Km cuando el experimento lo permita.
- Comprueba en el resultado a cuántas Km llegó el sustrato más alto. Por debajo de 5 × Km aparece un aviso, y esa Vmax no debe usarse tal cual.
- Mira si los puntos se aplanan en el borde derecho de la gráfica. Si siguen subiendo, hay que llegar a sustratos más altos.
💡 Sirve cualquier unidad: Km sale en tus unidades de concentración y Vmax en tus unidades de velocidad.
Fórmula y precauciones
La velocidad sube con el sustrato hasta que la enzima se satura y deja de subir. Escribir esa forma con dos números es la ecuación de Michaelis–Menten.
Los dos parámetros
Vmax es la velocidad con sustrato infinito; Km es la concentración de sustrato a la que la velocidad es la mitad.
- Velocidad
- v = Vmax · [S] / (Km + [S])
- Km, por definición
- v(Km) = Vmax / 2
Vmax / Km
La pendiente de la curva con sustrato muy diluido. Es el mejor número único para comparar enzimas o sustratos, porque resume un cambio en cualquiera de los dos parámetros donde Km o Vmax por separado contarían media historia.
Por qué Km siempre es positiva
Los puntos ruidosos a sustrato bajo pueden hacer que una Km negativa salga aritméticamente más barata. Pero una Km negativa no es una constante de velocidad: es la búsqueda saliéndose del modelo, así que ambos parámetros se mantienen positivos.
Precauciones
- ⛔ Si no son velocidades *iniciales*, la ecuación no se aplica. Las lecturas de punto final, o las tomadas cuando la reacción ya se ha frenado, siguen produciendo una curva y una Km y ninguna significa nada. Ningún cálculo puede detectarlo.
- Sin sustrato bastante por encima de Km, la Vmax la fija el modelo y no los datos. Por eso el sustrato más alto se informa siempre en múltiplos de Km.
- Km no es una propiedad fija de una enzima: es el valor en esas condiciones. El pH, la temperatura, la fuerza iónica y el amortiguador la mueven. Compara las condiciones antes que los números.
- Una R² alta no significa que el modelo sea correcto. Importa más si los puntos se dispersan de forma pareja a lo largo de la curva.
- Los errores estándar dicen con cuánta estrechez tus puntos fijan Km y Vmax. La reproducibilidad del ensayo es otra pregunta que solo responden las réplicas.
Preguntas frecuentes
Referencias
Contra qué se comprobó el motor de ajuste no lineal de esta herramienta. La ecuación de Michaelis–Menten en sí es una definición y no se cita.
- National Institute of Standards and Technology. Statistical Reference Datasets (StRD), Nonlinear Regression — Misra1a, Rat42 (Ratkowsky2) and MGH09, certified values. Read 2026-08-18.https://www.itl.nist.gov/div898/strd/nls/nls_main.shtmlEl motor de mínimos cuadrados no lineales que comparten ELISA, IC50 y Michaelis–Menten se comprueba contra los valores certificados de estos tres conjuntos de datos: parámetros reproducidos con 11 cifras en Misra1a, 9 en Rat42 y 7 en MGH09. NIST clasifica Rat42 y MGH09 como de «dificultad superior» (higher difficulty). MGH09 es una función racional, la misma familia que la ecuación de Michaelis–Menten, y tiene un mínimo local documentado
Se usan a menudo juntas
Calculadora de IC50 y EC50
Obtiene la IC50 y la pendiente de Hill a partir de datos de dosis–respuesta.
Molaridad
Calcula la masa, el peso molecular, el volumen o la molaridad a partir de los otros tres.
Selector de prueba estadística
Elige la prueba estadística que encaja con tus datos y la ejecuta.