사용 방법
- 완성된 반응 하나의 부피와, 몇 개를 준비할지 정합니다.
- 위에 얹을 여유분을 정합니다. % 는 규모에 따라 같이 늘고, 반응 수로 더하는 쪽은 소규모에 맞습니다.
- 반응 하나에 들어가는 것을 적습니다. 부피를 직접 넣어도 되고, 스톡·최종 농도를 넣어 부피가 따라오게 해도 됩니다.
- 물은 나머지를 채우는 성분으로 둡니다. 반응 부피에서 나머지 전부를 뺀 값이 됩니다.
- 전체 열을 읽습니다. 그것이 튜브에 실제로 넣을 양입니다.
계산 방법과 주의사항
각 성분을 1반응에서 전체 규모로 늘리고, 한 성분이 남은 차이를 메웁니다.
스톡·최종 농도로 부피 구하기
반응 부피가 바뀌어도 계속 맞는 것은 이 쌍뿐입니다. 부피 대신 이것을 넣는 이유입니다.
- 1반응당 µL = 최종 농도 ÷ 스톡 농도 × 반응 부피
전체 규모
여유분은 반응 수에 한 번만 적용되므로 성분끼리의 비율은 유지됩니다.
- 만드는 반응 수 = 반응 수 × (1 + 여유분 ÷ 100)
- 전체 µL = 1반응당 µL × 만드는 반응 수
나머지를 채우는 성분
- 물 = 반응 부피 − 나머지 전부
알아 둘 것
- 여유분이 필요한 이유는 팁과 튜브마다 남는 양이 있기 때문입니다. 10 % 가 흔한 출발점이고, 반응이 몇 개뿐이면 % 보다 반응 수로 한둘 더하는 편이 가늠하기 쉽습니다.
- 스톡·최종 농도가 있으면 직접 넣은 부피보다 우선합니다. 감추지는 않습니다 — 나온 부피가 표에 그대로 보입니다.
- 여기서는 주형도 보통 성분 한 줄입니다. 플레이트에서는 웰마다 따로 넣는데, 그 점이 이 도구와 PCR 플레이트 배치 도구의 차이입니다.
- 이 도구와 PCR 플레이트 배치 도구는 같은 구현을 씁니다. 그래서 두 도구가 서로 다른 수를 말할 수 없습니다.
자주 묻는 질문
피펫이 남기는 양을 덮을 만큼이면 되고, 그 양은 규칙이 아니라 옮기는 횟수에 달려 있습니다. 대부분의 프로토콜은 10 % 에서 시작합니다. 반응이 몇 개뿐이면 % 보다 반응 하나둘을 더하는 편이 계산이 쉽습니다.
부피가 «정하는 값»이 아닌 유일한 성분이기 때문입니다. 반응 부피에서 나머지를 뺀 값이라, 다른 성분이 바뀌면 함께 바뀝니다.
됩니다. 스톡과 최종 농도를 같은 단위로 넣으면 반응 부피에서 부피가 따라 나옵니다. 나중에 반응 부피를 바꿔도 계속 맞기 때문에 이쪽이 더 나은 입력입니다.
반응 수가 들어오는 방식만 다릅니다. 그쪽은 배치한 웰을 세고 이쪽은 숫자를 받습니다. 아래의 계산은 같은 코드라서 같은 믹스면 같은 답이 나옵니다.
그러면 물이 들어갈 자리가 없어 적은 대로는 만들 수 없습니다. 반응 부피가 작거나, 성분 중 하나의 부피가 큰 것입니다.