사용 방법
- ① 배양 방식을 고릅니다. 부착형이면 목표를 cells/cm²로, 부유형이면 cells/mL로 받습니다. 플레이트를 쓴다면 채우는 방법도 함께 고릅니다.
- ② 현재 세포 밀도와 생존율을 입력합니다. 밀도는 세포 계수 계산기에서 산출한 값입니다. 이 칸이 비어 있으면 결과가 표시되지 않습니다.
- ③ 목표 씨딩 밀도를 확인하고 용기 행을 추가합니다. 용기를 선택하면 출처의 권장 배지 부피가 자동 입력됩니다. 플레이트는 가장자리 칸을 제외할 수 있습니다.
- ④ 벤치 레시피를 확인합니다. 용기별로 넣을 현탁액과 배지, 전체 합계가 산출됩니다. 칸당 부피가 너무 적으면 중간 희석 방법이 함께 제시됩니다.
- ⑤ 이어서 할 일을 확인합니다.
공식 설명 및 주의사항
씨딩 계산은 나눗셈 한 번입니다. 필요한 세포 수를 지금 밀도로 나누면 넣을 현탁액 부피가 나옵니다. 신경 써야 할 점은 나눗셈이 아니라 그 앞뒤입니다.
계산식
부착형/부유형 선택시 「필요한 세포 수」를 구하는 줄만 다릅니다.
- 생존 세포 밀도 (cells/mL)
- 지금 밀도 × 생존율 ÷ 100
- 부착형
- 목표 밀도(cells/cm²) × 바닥 넓이(cm²)
- 부유형
- 목표 밀도(cells/mL) × 작업 부피(mL)
- 현탁액 (mL)
- 필요한 세포 수 ÷ 살아 있는 밀도
- 배지 (mL)
- 작업 부피 − 현탁액
- 희석 배수
- 살아 있는 밀도 ÷ 웰에 담기는 밀도
가장자리를 제외할 때
바깥 한 줄을 비우면 남는 칸은 (행 − 2) × (열 − 2)입니다.
- 96웰 (8 × 12)
- 6 × 10 = 60칸 — 36칸을 비웁니다
- 48웰 (6 × 8)
- 4 × 6 = 24칸
- 24웰 (4 × 6)
- 2 × 4 = 8칸
- 12웰 (3 × 4)
- 1 × 2 = 2칸
- 6웰 (2 × 3)
- 모든 칸이 가장자리입니다.
주의사항
- ⚠️ 용기 표의 컨플루언시 수치는 출처에서 HeLa로 측정한 값입니다. 세포주마다 크게 다르므로 그대로 적용하지 마세요. 출처의 각주에 명시된 사항입니다.
- ⚠️ 여유율 10 %와 피펫 최소 부피 2 μL는 이 도구의 기본값이며 출처에서 인용한 수치가 아닙니다. 근거가 필요한 자리에는 인용하지 마세요.
- 「한 통에 만들어 나눠 담기」는 편의상의 선택이 아니라 결과가 달라지는 방식입니다. 칸마다 현탁액을 개별 분주하면 소량 피펫팅의 오차가 그대로 칸 간 세포 수 편차로 남습니다.
- 가장자리 칸은 증발이 심해 보통 비우거나 PBS로 채웁니다. 96웰이라면 실제로 쓰는 칸은 60칸입니다.
- 세포주별 기본 씨딩 밀도와 배가시간은 제공하지 않습니다. 1차 출처를 확보하지 못했고(ATCC 제품 페이지도 배가시간을 싣지 않습니다), 조건에 따라 크게 변동하는 값이라 근거 없는 기본값보다 직접 입력하시는 편이 정확합니다.
- 진탕플라스크와 바이오리액터는 목록에 없습니다. 권장 작업 부피의 1차 문서를 확보하지 못했습니다. 부유 배양은 작업 부피를 직접 입력하면 그대로 계산 가능합니다.
- 부착형 세포를 씨딩한 뒤에는 플레이트를 앞뒤·좌우로 밀어 분산시키세요. 원을 그리며 회전시키면 세포가 중앙으로 집중됩니다.
자주 묻는 질문
용기를 선택하면 출처 표의 권장값이 자동 입력됩니다. 다만 이는 일반적인 기준이며, 세포주와 실험 목적에 따라 달라집니다. 가장 크게 좌우하는 것은 사용 시점입니다. 다음 날 사용할 예정이면 조밀하게, 3일 뒤라면 성기게 씨딩합니다.
결과가 다릅니다. 칸마다 개별 분주하면 칸당 현탁액이 수 μL에 불과한 경우가 많고, 그 소량 피펫팅의 오차가 그대로 칸 간 세포 수 편차로 남습니다. 목표 밀도로 한 통을 조제한 뒤 동일 부피씩 분주하면 이 오차가 해소됩니다. 플레이트 사용 시에는 이 방식을 기본으로 보셔도 됩니다.
바깥 한 줄은 배지 증발이 빨라 안쪽 칸과 배양 조건이 달라집니다. 그래서 비워 두거나 PBS·멸균수를 채우는 것이 일반적입니다. 96웰이면 36칸이 제외되어 실사용 칸은 60칸이며, 계산도 60칸 기준으로 수행합니다.
경고와 함께 해결 방법을 제시합니다. 현탁액을 몇 배로 희석하고, 거기서 칸당 몇 μL를 넣으면 되는지 산출합니다. 희석 배수는 기준을 넘기는 최솟값으로 선택합니다. 조작 단계가 늘어날수록 오차가 개입할 여지도 늘기 때문입니다. 더 여유 있게 분주하려면 「피펫 최소 부피」를 올리세요.
세포주별 기본 씨딩 밀도와 배가시간은 신뢰할 만한 1차 출처가 없습니다. ATCC 제품 페이지에도 배가시간이 없고, 발현 시스템 안내서의 수치는 형질주입 당일 밀도라 일상 계대의 기본값으로는 부적합합니다. 조건에 따라 크게 변동하는 값을 근거 없이 기본값으로 두기보다, 직접 입력하시는 편이 정확합니다.
사멸 세포는 계수에 포함되더라도 증식하지 않으므로, 생존 세포만으로 밀도를 재계산합니다. 생존율 80 %면 동일한 세포 수를 확보하는 데 현탁액이 25 % 더 필요합니다. 그 차이는 화면에 문장으로 표시됩니다.
참고문헌
용기 표의 출처입니다. 바닥 면적, 배지량, 씨딩 세포 수, 포화 세포 수 네 항목 모두 한 문서에서 옮겼습니다. 15개 용기의 값 60개를 2026-08-21에 재대조해 전부 일치했습니다.
- Gibco (Thermo Fisher Scientific). Useful Numbers for Cell Culture — Cell Culture Basics. Read 2026-08-21.https://www.thermofisher.com/us/en/home/references/gibco-cell-culture-basics/cell-culture-protocols/cell-culture-useful-numbers.html접시 4종, 플레이트 7종, 플라스크 4종의 표 전체. 포화 세포 수가 HeLa 기준이라는 각주도 이 문서의 내용입니다
플레이트의 행·열(6웰 = 2 × 3 등)은 이 문서에 없으며 SBS 표준 배치입니다. 진탕 플라스크와 바이오리액터의 작업 부피는 1차 출처를 확보하지 못해 표에서 제외했습니다.