ELISA 표준곡선

1사용 방법

1. 첫 칸에 표준물질 계열을 붙여넣습니다. 앞 열이 기지 농도, 뒤 열이 측정값입니다. 0 농도 표준물질은 제외하지 마세요. 그것이 블랭크이며, 적합이 이를 하부 평탄부로 사용합니다.
2. 둘째 칸에 시료를 붙여넣습니다. 이름, 측정값, 그리고 웰에 분주하기 전에 희석했다면 희석배수 순서입니다. 열은 탭·쉼표·띄어쓰기 두 칸으로 구분합니다.
3. 표에서 농도를 확인합니다. 희석배수는 이미 반영되어 있으며, 웰 내 농도가 그 아래에 함께 표시됩니다.
4. 표 아래 곡선으로 확인합니다. 표준물질이 양쪽 끝에서 곡선에 밀착해야 합니다. 밀착하지 않으면 그 평탄부는 추정값이며, 그 근처의 모든 농도가 그 추정을 그대로 물려받습니다.
5. 「곡선 밖」으로 표시된 행은 의도적으로 수치를 산출하지 않은 것입니다. 해당 시료는 희석해 재측정해 주세요.

💡 단위는 사용자가 정합니다. 표준물질을 입력한 단위 그대로 시료 결과가 산출됩니다.

2공식과 주의사항

면역측정은 직선 관계를 따르지 않습니다. 결합할 대상이 적은 하부는 평탄하고, 중간부는 급격하며, 항체가 포화된 상부는 다시 평탄합니다. 전체적으로 S자 형태이며, 여기에 직선을 적합하면 중간부를 제외한 모든 구간에서 오차가 발생합니다.

실무 주의사항

• 표준물질은 시료와 동일한 플레이트에서 수행합니다. 이전 플레이트의 곡선을 가져오면 그때의 코팅·기질·인큐베이션 조건까지 함께 반영됩니다.
• 블랭크를 미리 차감하지 말고 0 농도 표준물질로 입력하세요. 하부 평탄부가 곧 블랭크이며, 웰 하나가 아니라 계열 전체에서 추정한 값입니다. 차감한 뒤 다시 평탄부를 적합하면 같은 값을 이중으로 반영하게 됩니다.
• 반복 웰은 각각 한 행으로 입력합니다. 두 웰을 모두 반영한 적합이 평균만 반영한 적합보다 정보량이 많고, 두 행이 어긋나면 그 자체로 확인할 가치가 있습니다.
• 평탄부를 벗어난 측정값에는 대응하는 농도가 없습니다. 값이 큰 것이 아니라 존재하지 않는 것입니다. 희석해 재측정하세요. 희석배수 열이 결과를 원래 눈금으로 환원합니다.
• 외삽과 산출 불가는 다릅니다. 최저 표준물질 아래나 최고 표준물질 위의 농도는 곡선상에 존재하지만, 그 구간에서 측정한 표준물질이 없으므로 그 값은 곡선의 추정에 불과합니다.
• R²가 높다는 것은 곡선이 점 근처를 지난다는 뜻입니다. 평탄부에 도달했는지는 알려 주지 않는데, 역산이 나누는 값이 바로 평탄부까지의 거리입니다.

3자주 묻는 질문