PCR 조건 설계기

1사용 방법

1. 쓰는 중합효소를 고릅니다. ⚠️ 효소마다 «온도가 다릅니다» — 같은 Taq 계열이라도 신장이 68 °C 인 것과 65 °C 인 것이 있습니다.
2. 앰플리콘 전체 길이를 bp 로 넣습니다. 신장 시간만 이 길이에서 계산되고, 나머지 줄은 프로토콜 값 그대로입니다.
3. 표를 그대로 서멀사이클러에 넣습니다. 파란 줄 셋이 반복되는 구간이고, 옆의 «× 숫자»가 사이클 수입니다.
4. 어닐링 온도는 «범위»로만 나옵니다. 그 칸의 «Tm 계산기» 링크로 넘어가 프라이머로 직접 구하십시오.

💡 표 아래 링크는 그 값을 옮겨 온 제조사 프로토콜 원문입니다. 조건이 잘 안 맞으면 거기부터 보십시오.

2공식과 주의사항

이 도구가 «계산»하는 것은 신장 시간 하나뿐입니다. 나머지 줄은 제조사가 인쇄한 값을 그대로 옮긴 것입니다.

주의사항

• 여기 실린 것은 «루틴 PCR» 조건입니다. GC 가 높거나, 이차구조가 심하거나, 주형이 매우 적거나, 앰플리콘이 아주 길면 프로토콜 본문이 추가 최적화를 안내합니다 — 링크에서 확인하십시오.
• 앰플리콘 길이는 프라이머 «바깥쪽 끝까지» 재십시오. 프라이머 사이 거리만 재면 신장 시간이 짧게 나옵니다.
• 표에 없는 효소는 넣지 않았습니다. 프로토콜을 직접 열지 않은 값을 여기 적으면 화면에서는 출처 있는 값과 구별되지 않습니다.
• 핫스타트 효소는 초기 변성 조건이 다를 수 있습니다. 쓰시는 제품의 프로토콜을 확인하십시오.

3자주 묻는 질문